La capacité à estimer le nombre de plaquettes est une compétence essentielle pour travailler en laboratoire. Les plaquettes sont des fragments de cytoplasme qui aident le sang à se coaguler. Le nombre de plaquettes est utilisé pour déterminer la thrombocytopénie (faible nombre de plaquettes) et la thrombocytose (nombre élevé de plaquettes). Selon l'Institut national de la santé, le nombre de plaquettes normal se situe entre 150 000 et 400 000 plaquettes par microlitre de sang. La thrombocytopénie est associée à une anémie aplasique, à une carence en folate, à une carence en vitamine B12 et à des leucémies aiguës. La thrombocytose est associée à une anémie hémolytique et à une polycythémie vraie (production excessive de globules rouges).
$config[code] not foundDiluez l’échantillon de sang dans un rapport 1: 100 du sang au diluant (oxalate d’ammonium). Retirez la pipette de son écran de manière aseptique en poussant l'extrémité de son écran à travers le diaphragme situé dans le col du réservoir. Toucher la lèvre de la pipette avec le sang et laisser l’alésage de la pipette se remplir de sang. Couvrez l'ouverture de la pipette avec l'index et placez la pipette dans le col du réservoir. Relâchez la pression sur le réservoir et retirez votre index de la pipette. Laisser reposer pendant 10 minutes pour permettre aux globules rouges de s'hémolyser.
Remplissez l'hémocytomètre, qui est du côté du verre, avec une chambre de comptage contenant des lignes mesurées de profondeur connue, avec du sang en pressant les côtés du réservoir; puis placez l'hémocytomètre dans une boîte de Pétri couverte et laissez reposer pendant 10 minutes. Placez l'hémocytomètre sur la platine (la plate-forme plate utilisée pour le montage des lames) d'un microscope à lumière vive ou à phase et mettez au point la zone réglée de l'hémocytomètre à l'aide de l'objectif de faible puissance.
Passez à l'objectif 43X pour augmenter votre grossissement et mettez au point le grand carré central de l'hémocytomètre. Compter les plaquettes dans les 25 carrés du grand carré de l'hémocytomètre, en comptant de gauche à droite dans la première ligne, puis de gauche à droite dans la deuxième ligne jusqu'à ce que toutes les lignes soient terminées.
Multipliez le nombre de cellules comptées par 1 000 pour obtenir le nombre total de plaquettes. Par exemple, si le nombre de cellules comptées est égal à 250, 250 x 1 000 = 250 000 plaquettes par microlitre.
Pointe
Vous devez faire votre estimation dans une zone du frottis dans laquelle les globules rouges se touchent à peine. Répétez la procédure si vous voyez des amas de plaquettes.
Attention
Effectuer le comptage des plaquettes dans les 3 heures suivant la préparation de la dilution.
